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蛋白電泳在雜交水稻的種子真實性及純度鑒定中的應用

時間:2019-06-30 08:23來源:畢業論文
利用4種雜交水稻品種二優728、 鹽兩優888、 協優728和深兩優9310的種子作為試驗材料, 采用聚丙烯酰胺凝膠電泳( SDS-PAGE) 的方法獲得水稻種子中儲藏蛋白的電泳圖譜

摘要: 利用4種雜交水稻品種二優728、 鹽兩優888、 協優728和深兩優9310的種子作為試驗材料, 采用聚丙烯酰胺凝膠電泳( SDS-PAGE) 的方法獲得水稻種子中儲藏蛋白的電泳圖譜, 比較分析其多態性; 同時研究并檢驗種子蛋白SDS-PAGE技術鑒定水稻品種真實性和純度的可行性。 結果表明: 水稻種子總蛋白涵蓋25條不同譜帶并在在不同品種之間存在差異, 有較強的多態性。 并在鑒定試驗中發現品種純度的實驗值17.89%與理論值16.67%相差在5%以內, 利用蛋白電泳鑒定水稻種子的真實性與純度鑒定具有靈敏度和可靠性較高、 應用范圍廣、 成本低以及不易受環境因素影響等優點, 因而可廣泛應用于雜交水稻品種的真實性和純度鑒定。36760
畢業論文關鍵詞: 雜交水稻種子; 蛋白電泳; SDS-PAGE; 真實性; 純度
Application ofprotein electrophoresis in the authenticity andpurity identification ofhybrid rice seeds
Abstract: Experiment four varieties of seeds as experimental material by SDS-PAGEelectrophoresis of hybrid rice seed storage protein electrophoresis, comparative analysisof its polymorphism. Meanwhile, study and test the feasibility of seed proteinSDS-PAGE technology for rice variety identification of authenticity and purity. Theresults show that there are 25 protein specific bands. In addition to this , we designed anotherexperiment to further validate the feasibility of the way. The theoretical value of varietal purity is16.67% while the practical result is 17.89%. Use this polymorphism complete authenticityand purity identification of rice seeds. And found that using protein electrophoresis therice seed authenticity and purity identification with sensitivity and high reliability, wideapplication range, low cost and easy affected by environmental factors, ,etc., and can bewidely used in identifying the authenticity and purity of the rice varieties. 源¥自%六^^維*論-文+網=www.aftnzs.live
Keywords: Hybrid rice seed; Protein electrophoresis; SDS-PAGE; Authenticity; Purity
目錄
摘要1
關鍵詞1
Abstract1
Keywords1
引言1
1.材料與方法2
1.1材料2
1.2主要實驗試劑與設備2
1.2.1主要試劑的配制2
1.2.2主要實驗設備3
1.3實驗方法3
1.3.1試驗設計3
1.3.2蛋白提取4
1.3.3電泳過程4
1.4數據分析4
2結果與分析4
2.1各品種混合磨樣的SDS-PAGE圖譜分析5
2.2各品種單粒磨樣的SDS-PAGE圖譜分析7
2.2.1單粒磨樣圖譜分析7
2.2.2確定品種純度9
2.3兩個品種混合單粒磨樣的SDS-PAGE圖譜分析10
3討論11
3.1種子真實性及純度檢驗的必要性12
3.2蛋白電泳技術的可行性12
3.3試驗條件的優化12
致謝13
參考文獻13
水稻作為我國的第一大糧食作物, 其中雜交水稻的種植面積就占據了我國水稻總種植面積的60%, 可謂其每年生產的糧食養活了我國的大部分人口 [1]。 長久以來, 相關的科學家們一直致力于研究培育高品質、 高產量的水稻品種, 但是雜交水稻種子的真實性以及純度問題一直困擾著我國水稻的種子生產。 種子的真實性問題主要是由于一些不法商家為了獲取暴利, 販賣假種子, 給農民造成巨大的經濟損失, 同時也可能產生較大的糧食安全問題。
同樣, 這樣的手段也會影響到種子的純度問題, 但是自 然環境條件對于雜交水稻種子的純度, 也是影響巨大的。雜交水稻中的兩系雜交稻就極易受到環境條件的影響, 在制種期間如若出現不適宜的溫度, 異常低溫或者高溫都可能會引 起育性的波動而導致不育系部分自 交結實, 從而種子的純度降低, 給兩系雜交稻的大面積生產帶來很大的風險[2]。 因此雜交水稻種子的真實性以及純度的鑒定一直備受種子質檢局、 國家糧食安全局以及各大種子生產商、 種子公司的關注。水稻種子的真實性以及純度鑒定方法主要有種子形態鑒定法[3]、 化學鑒定法[4]、幼苗鑒定法[5]和田間小區種植鑒定[6.7]等常規鑒定方法。 但這些方法存在應用范圍小、 準確度不高、 鑒定成本高等缺點。 同工酶多態性分析[8]也曾用于水稻品種的鑒定, 此法具有靈敏度高、 準確、 經濟、 易于操作等優點 但在遺傳關系比較近似的品種間難于找到較大的多態性, 而且該法也存在結果不穩定的缺陷, 目 前的研究大多局限于酯酶和過氧化物酶兩種, 對其它酶的研究方法并不完善。目 前, 分析種子中的儲藏蛋白并利用蛋白電泳技術是種子的真實性及純度鑒定中應用比較廣泛的方法。 其中蛋白質的十二烷基磺酸鈉聚丙烯酞胺凝膠電泳即SDS-PAGE技術已被認為是一種簡便、 準確性高、 快速、 重復性好且成本較低的鑒定方法。 利用SDS-PAGE技術鑒定種子的真實性和純度, 已在辣椒[9]、 小麥[10]、 啤酒大麥[11]、 菜豆[12]中獲得成功, 水稻種子貯藏蛋白質提取容易,無需低溫,需時較短, 再加上蛋白質是基因表達的產物, 品種間的遺傳差異可能形成蛋白質的多態性,通過電泳技術可以得到多態性的蛋白質指紋圖譜, 從而用于鑒別不同品種。 不同品種由于遺傳組成不同, 其蛋白質在種類、 數量、 大小及結構等方面也不同, 通過電泳形成不同的蛋白質譜帶, 從而可以鑒別品種的真實性和純度。 水稻雜交種與其親本種子、 包括部分外觀形態與雜交種相似的常規種子的SDS-PAGE蛋白電泳圖上各具有自 己的特征性譜帶,其譜帶數目 、 位置、 寬窄和顏色深淺都存在明顯的差異。 利用這種差異,在同一實驗條件下用SDS-PAGE蛋白電泳結果鑒別雜交水稻種子是可行的[13]。本研究采用 4 個不同的水稻品種, 通過比較蛋白條帶特異性來評估各品種種子的真實性與純度, 同時探究 SDS-PAGE 技術在水稻種子真實性和品種純度鑒定方面的可行性, 并探究其在今后種子質量認證中的廣泛應用。 蛋白電泳在雜交水稻的種子真實性及純度鑒定中的應用:http://www.aftnzs.live/shengwu/20190630/35331.html
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