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不同濃度CdCl2、ZnCl2對釀酒酵母基因組的影響

時間:2019-04-27 20:10來源:畢業論文
以安琪酵母為材料,用酵母完全培養基(YPD培養基)進行培養。通過稀釋涂布平板法挑選出純菌落。經過鏡檢之后,選取活性高的菌株進行擴大培養。對培養至對數期的酵母,用不同濃

摘  要:以安琪酵母為材料,用酵母完全培養基(YPD培養基)進行培養。通過稀釋涂布平板法挑選出純菌落。經過鏡檢之后,選取活性高的菌株進行擴大培養。對培養至對數期的酵母,用不同濃度的CdCl2,ZnCl2 對釀酒酵母進行48 h脅迫處理,對刺激處理后酵母進行活細胞/死細胞計數比,觀察生長曲線,并破碎酵母細胞壁,提取酵母基因組DNA,對處理過的酵母DNA進行凝膠電泳實驗。34986
畢業論文關鍵字:釀酒酵母;CdCl2; ZnCl2; 脅迫處理;基因組
Different Concentration of CdCl2,ZnCl2 Effect on Saccharomyces Cerevisiae Genome
Abstract: The experiment used Angel yeast as the material, Yeast was incubated by yeast culture medium (YPD medium). Through the method of dilution coated tablet single yeast colony was selected. After a detection, the yeast strain were cultured in YPD medium. The yeasts were cultured to the logarithmic phase of yeast, and were stressed with different concentration of CdCl2, ZnCl2 for 48 h. The stressed yeast cells were counted, and yeast cells wall were broken, yeast were extracted genomic DNA and analyzed using DNA gelectrophoresis technique.
Key words: Saccharomyces cerevisiae; CdCl2 ; ZnCl2 ; Stress treatment; The genome
目    錄

 摘  要    1
 引言    1
1. 材料和方法    2
1.1 實驗材料    2
1.1.1 菌株    2
1.1.2培養基和緩沖液(YPD培養基)    2
1.1.4主要儀器    4
1.2 實驗方法    4
1.2.1釀酒酵母活化    4
1.2.2 酵母的初篩    4
1.2.3 酵母的復篩    5
1.2.4 酵母菌的鑒定    5
源¥自%六^^維*論-文+網=www.aftnzs.live

1.2.5酵母菌的擴大培養    5
1.3釀酒酵母的脅迫處理    5
1.3.1用不同濃度的CdCl2,ZnCl2溶液對酵母進行脅迫處理    5
1.3.2不同濃度的CdCl2,ZnCl2溶液培養下釀酒酵母活細胞與死細胞計數比值    6
1.4釀酒酵母的破壁處理    6
1.4.1釀酒酵母破壁條件的確定    6
1.4.2釀酒酵母的破壁    6
1.5釀酒酵母基因組DNA的提取    6
1.6釀酒酵母基因組的瓊脂糖凝膠電泳    7
2.結果與分析    8
2.1酵母菌的活化    8
2.2酵母菌的初篩    9
2.3酵母菌的復篩    9
2.4酵母菌的鑒定    10
2.5酵母菌的脅迫處理    11
2.6酵母基因組DNA提取    14
3.結論及展望    14
參考文獻    15
致謝    17
不同濃度CdCl2、ZnCl2對釀酒酵母基因組的影響
    引言
鎘(Cd)是一種廣泛的環境污染物,是危害性很大的“五毒”元素之一,對自然界和人類具有很大的毒害作用[1-2]。Cd的毒性包括線粒體損傷,以及通過細胞凋亡或壞死導致的細胞死亡。Cd通過抑制DNA錯配修復系統和其他DNA修復系統而干擾基因組的穩態,此外,還造成脂質過氧化今兒影響硫氧還蛋白、還原性谷胱甘肽和液泡分泌系統的活力[3-5]。
鋅(Zn)是人類和動物體內的必需微量元素之一,其參與體內120多種酶的生物合成,同時還調節300多種酶促反應,涉及蛋白質、核酸、激素、能量等代謝。而鎘與鋅的相似性,使其能在體內替代那些處于酶活性中心的鋅元素,從而導致一系列效應。 源¥自%六^^維*論-文+網=www.aftnzs.live
釀酒酵母是現今科研上經過深入研究“模式生物”之一,具有細胞生長快、易于培養,遺傳操作簡單等原核生物的特點,隨著釀酒酵母基因組序列信息的不斷積累和測序工作的不斷完成,酵母基因組學的研究重點已由傳統的結構基因組學發展到了功能基因組學,被廣泛的應用于真核生物基因工程的研究,并由此更系統地去了解真核生物生命活動的本能。本研究以釀酒酵母為實驗材料,研究濃度的CdCl2,ZnCl2對釀酒酵母基因組的影響,進而推動有關重金屬對真核生物基因組影響的研究[6-8]。本研究采用液體培養(YPD液體培養基)的方式,測定不同濃度的CdCl2,ZnCl2對釀酒酵母基因組的影響。采用液體培養的方式,從安琪酵母中分離純化釀酒酵母,擴大培養后接種到含不同濃度CdCl2, ZnCl2的YPD液體培養基中培養48 h,然后測出不同濃度下,釀酒酵母的生長曲線,死亡率,進行釀酒酵母基因組DNA的提取。 不同濃度CdCl2、ZnCl2對釀酒酵母基因組的影響:http://www.aftnzs.live/shengwu/20190427/32723.html
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