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FITC在氨基化合物定量分析中的應用研究

時間:2019-04-07 09:13來源:畢業論文
闡述了通過研究FITC與多種含氨基化合物的相互作用,發現一些氨基化合物能夠使FITC的熒光強度增強且改變反應條件多次測量其熒光強度的變化

摘要:本文闡述了通過研究FITC與多種含氨基化合物的相互作用,發現一些氨基化合物能夠使FITC的熒光強度增強且改變反應條件多次測量其熒光強度的變化。
畢業論文關鍵詞:FITC、氨基化合物、熒光強度 34325
FITC applied research in the quantitative analysis of amino compounds
Abstract: This paper discusses the interaction through a variety of research and FITC-containing amino compounds,It found that some amino compound capable of FITC fluorescence intensity is enhanced and changing the reaction conditions repeatedly measure the change in the fluorescence intensity.
Keywords: FITC; Amino compound; fluorescence intensity
前言
FITC的相對分子質量是389.4,它的最大吸收光波長在492 nm左右,最大發射光波長在525 nm到530 nm之間。FITC的強度易受溶液pH值的影響,溶液的堿性越強其強度也越強[1]。FITC見光易漂白所以應該保存在冷暗干燥處,例如冰箱且保存時間較長。FITC在目前的生活生產中應用及其廣泛,其中就包括對氨基化合物的檢測[2]。生物胺是我們所研究的氨基化合物中的重要的一類,它是一種含氮化合物,它在微生物和動植物的生長過程中都起著非常重要的作用。生物胺在我們的生活中也扮演著重要的角色,因為生物胺含量的多少決定著食品的質量。所以現代社會人們對生物胺的檢測給予越來越多的注意與重視[3]。
對于生物胺的檢測目前常用方法也有許多,比如離子色譜法、高效液相色譜法、薄層色譜法、氣相色譜法、毛細管電泳法等等[4-7]。諸多檢測方法在操作檢測過程中都顯得比較麻煩且對于生物胺的濃度有一定的限制,要求生物胺的濃度要達到一定的濃度才能進行檢測。這對于那些生物胺含量較低的物質來說,很難通過上述方法檢測出來[8]。通常使用的這些方法還有一些弊端,這些檢測方法所需的實驗試劑和藥品大多會對環境造成污染而且對操作人員也會有影響。在現今如此重視和強調環保重要性的時代,這些應該都是不可取的,所以此時采用FITC來檢測氨基化合物的方法就顯得十分有意義。此方法不僅操作簡潔,對儀器試劑藥品要求也不高最重要的是大大降低了其實驗過程中對操作人員的傷害以及對環境的污染問題。

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用FITC來檢測氨基化合物目前已被用于醫學、農學和畜牧等方面。其應用也及其廣泛,可以測定蛋白質、多肽、神經遞質、細胞表面抗原、血藥濃度、核酸、受體、細胞因子等各種生物活性物質。由此可見,加快進行對關于FITC在氨基化合物定量分析中的應用研究的相關實驗就顯得十分必要。
實驗部分
1.實驗藥品
FITC、2-苯乙胺、3,4-二羥基苯甲酸、1,4丁二胺、酪胺、亞精胺、精胺、多巴胺、領苯二胺、對氯苯胺、色胺、尸胺(天津希恩思生化科技有限公司)、磷酸二氫鉀(國藥集團化學試劑有限公司)、二次水。
2.實驗儀器
F-4500熒光分光光度計(日本HITACHI公司),1-10 µL、10-100 µL、100-1000 µL、1000-5000 µL移液槍(大龍興創實驗儀器有限公司),pH計,微量熒光比色皿(江蘇新力科技實力有限公司)。
3.實驗方法
(1) 緩沖溶液的配制:
1.稱取4.001 g左右的氫氧化鈉并配置濃度為1 M左右的溶液100 mL。
2.用實驗室濃鹽酸制備1 M左右的Hcl溶液50 mL。
3.準確稱取0.340 g磷酸二氫鉀并配置濃度為0.01 M的溶液250 mL,用配置好的鹽酸和氫氧化鈉溶液調節pH至7.30。
(2) FITC溶液的制備:用移液槍移取3 µL的50 mM FITC貯備液,用二次水稀釋100倍,濃度為500 µM。
(3) 氨基試劑的配制:
1.準確稱量氨基化合物并配置濃度為0.1 M、500 µM、50 µM的氨試劑。 FITC在氨基化合物定量分析中的應用研究:http://www.aftnzs.live/shengwu/20190407/31795.html
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